De ce se utilizează acetocarmina în studiile cu cromozom mitotic

Se folosesc pete diferite pentru colorarea diferitelor materiale biologice. Petele reacționează cu o substanță specifică într-o probă biologică, dând o anumită culoare substanței respective. Acetocarmina este o pată folosită pentru demonstrarea acizilor nucleici din cadrul cromozomului. Există, de asemenea, alte motive care fac ca acetocarmina să fie mai potrivită ca pete de acid nucleic. Acestea sunt discutate în acest articol.

Domenii cheie acoperite

1. Ce este un Stain
     -  Definiție, tipuri de pete
2. Ce este Acetocarmina
     - Definiție, Caracteristici, Pregătire
3. De ce se utilizează acetocarmina în studiile cu cromozom mitotic
     - Prepararea, Utilizarea Acetocarminei

Termeni cheie: acetocarmină, cromozomi, formaldehidă, hidroliză, studii de cromozom mitotic, pigmente

Ce este Colorarea

Colorarea este o tehnică utilizată în studiile microscopice ale probelor biologice pentru a spori contrastul probei biologice sub microscop. Acesta evidențiază structurile țesutului biologic, cum ar fi populațiile celulare specifice, organele, ADN-ul, proteinele, carbohidrații și lipidele. Pata poate fi fie substanțe chimice sintetice, fie substanțe chimice naturale provenite de la plante sau animale. Metodele de colorare sunt descrise mai jos.

1. Colorație unică - În colorarea unică, doar o singură pată este utilizată pentru a da o singură culoare întregului eșantion biologic.
2. Dubla colorare - În dubla colorare, două pete sunt folosite pentru a pata organele specifice sau o zonă specifică.
3. Multiple colorare - În colorarea multiplă, se utilizează mai mult de două pete pentru colorarea specifică a componentelor cum ar fi organelele din probă.

Ce este Acetocarmina

Carmina este un colorant de bază preparat dintr-o insectă cunoscută sub numele de Coccus cacti. Acetocarmina este produsă prin amestecarea carminei cu acid acetic glacial. Este o pată specifică ADN-ului utilizată pentru vizualizarea cromozomilor super-coil în timpul diferitelor etape ale mitozei.

Prepararea colorării acetocarminei

1. Se dizolvă 10 g carmină în 1 I acid acetic glacial 45%.
2. Adăugați granule de aluminiu și reflux timp de 24 de ore.
3. Se filtrează în sticle întunecate și se păstrează la 4 ° C.
4. Colorarea poate fi intensificată prin adăugarea de clorură ferică (se adaugă 5 ml dintr-o soluție de clorură ferică 10% la 100 ml de acetocarmină%),.

De ce se utilizează Colorarea acetocarminei în studiile cu cromozom mitotic

În general, acetocarmina este un colorant utilizat în colorarea unică. Pare atât nucleul, cât și citoplasma. Pentru a colora cromozomii, păstrând în același timp citoplasma incoloră, proba biologică trebuie mai întâi tratată cu formaldehidă și apoi poate fi hidrolizată cu HCI la 60 ° C cu timpul corect de hidroliză. În cele din urmă, poate fi tratată cu acetocarmină. Acetocarmina produce agregate mari de colorant în condiții slab acide (pH 4-5). Demonstrarea mitozei rădăcinii de ceapă prin colorarea cu acetocarmină este prezentată în figura 1.

Figura 1: Mitoză de rădăcină de ceapă

Cu toate acestea, acetocarmina este puțin toxică decât celelalte pete de acid nucleic, cum ar fi aceto-orceina. Este, de asemenea, mai ieftin decât alte tipuri de pete.

Concluzie

Petele sunt utilizate în studii microscopice pentru a spori contrastul componentelor biologice specifice într-o probă. Acetocarmina este o astfel de pată utilizată pentru a pata acidul nucleic în interiorul celulelor. Deoarece acetocarmina specifică cromozomii colorați în afară de citoplasmă, poate fi utilizată pentru vizualizarea cromozomilor în studiile mitotice.

Referinţă:

1. "ACETOCARMINĂ DE CURĂȚARE". Universitatea Kansas State, disponibil aici.
2.J. A. Rattenbury (2009) Colorarea specifică a substanței nucleuice cu aceto-carmină, tehnologia Stain, disponibilă aici.

Datorită fotografiei:

1. "Mitoza rădăcinii cepei" Prin staticd - Activitate proprie (CC BY-SA 3.0) prin Wikimedia Commons