Diferența dintre citometria de flux și FACS

Diferența cheie - Citometria fluxului vs FACS

În contextul teoriei celulare, celulele reprezintă unitatea structurală și funcțională de bază a tuturor organismelor vii. Sortarea celulelor este o metodologie care se utilizează pentru a separa diferite celule în funcție de trăsăturile fiziologice și morfologice. Acestea pot avea caracteristici intracelulare sau extracelulare. Interacțiunea dintre ADN, ARN și proteine ​​sunt considerate proprietăți interacționale intracelulare, în timp ce forma, mărimea și diferite proteine ​​de suprafață sunt considerate proprietăți extracelulare. În științele moderne, metodologiile de sortare a celulelor au dus la asistarea diferitelor investigații în studiile biologice și, de asemenea, la stabilirea de noi principii prin cercetarea medicinii. Sortarea celulelor se efectuează pe diverse metodologii care includ atât tehnologii primitive, cât și tehnologii avansate, folosind tehnologii sofisticate. Citometrie în flux, sortarea fluorescentă a celulelor activate (FACS), selecția celulelor magnetice și sortarea cu celule singulare reprezintă principalele metodologii utilizate. Citometria de flux și FACS sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice. FACS este un tip special de citometrie de flux. Citometria de flux este o metodologie utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferitele molecule de suprafață celulară, mărime și volum care permite investigarea celulelor singulare. FACS este un proces prin care un amestec de celule de probă este sortat în funcție de caracteristicile lor de dispersie a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. Acesta este diferența cheie între citometria de flux și FACS.

CUPRINS

1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este Cytometry Flow
3. Ce este FACS
4. Asemănări între citometria de flux și FACS
5. Comparație comparați între ele - Citometria de flux vs FACS în formă tabulară
6. rezumat

Ce este Cytometry Flow?

Citometria în flux este o metodă care este utilizată pentru a examina și a determina expresia moleculelor intracelulare și a suprafeței celulare și pentru a defini și caracteriza tipurile distincte de celule. Este, de asemenea, utilizat pentru a determina volumul celulelor și dimensiunea celulelor și pentru a evalua puritatea subpopulațiilor izolate. Aceasta permite evaluarea multiparametrică a celulelor unice la aproximativ același timp. Citometria de flux este utilizată pentru măsurarea intensității fluorescenței care este produsă prin anticorpi marcați fluorescent care ajută la identificarea proteinelor sau a liganzilor care se leagă la celulele asociate.

Figura 01: Citometria fluxului

În general, citometria de flux include în principal trei sub-sisteme. Acestea sunt fluidele, electronica și optica. În citometria în flux, sunt disponibile cinci componente principale care sunt utilizate în sortarea celulelor. Acestea sunt o celulă de flux (un flux de lichid care este utilizat pentru a le transporta și a alinia celulele pentru procesul de detectare optică), un sistem de măsurare (pot fi de sisteme diferite, inclusiv lămpi cu mercur și xenon, lasere cu răcire cu aer redus sau lasere diode), un ADC; Sistem analogic la convertor digital, sistem de amplificare și calculator pentru analiză. Achiziția este procesul prin care datele sunt colectate din eșantioane utilizând citometrul de flux. Acest proces este mediat de un calculator care este conectat la citometrul de flux. Software-ul prezent în calculator analizează informația alimentată de la computer cu ajutorul citometrului de flux. Software-ul are, de asemenea, capacitatea de a ajusta parametrii experimentului care controlează citometrul de flux.

Ce este FACS?

În contextul citometriei în flux, Modificarea sortimentului de celule fluorescente (FACS) este o metodă utilizată pentru diferențierea și sortarea unei mostre dintr-un amestec de celule biologice. Celulele sunt separate de două sau mai multe recipiente. Metoda de sortare se bazează pe caracteristicile fizice ale celulei, care includ caracteristicile de dispersie a luminii și fluorescență ale celulei. Aceasta este o tehnică științifică importantă, care poate fi utilizată pentru a obține rezultate cantitative și calitative fiabile ale semnalelor fluorescente emise din fiecare celulă. În timpul FACS, inițial, amestecul pre-obținut de celule; o suspensie este îndreptată către centrul unui flux îngust de lichid care curge rapid. Fluxul de lichid este proiectat pentru a separa celulele din suspensie pe baza diametrului fiecărei celule. Un mecanism de vibrație este aplicat fluxului de suspensie care are ca rezultat formarea de picături individuale.

Figura 02: FACS

Sistemul este calibrat pentru a crea o singură picătură cu o singură celulă. Chiar înainte de formarea picăturilor, suspensia de curgere se deplasează de-a lungul unui aparat de măsurare a fluorescenței, care detectează caracteristica de fluorescență a fiecărei celule. La punctul de formare a picăturilor, se instalează un inel de încărcare electric, pe care o incizie este indusă în inel înainte de măsurarea intensității fluorescenței. Odată ce picăturile sunt formate din fluxul de suspensie, o încărcătură este prinsă în picături, care apoi intră într-un sistem de deformare electrostatic. Conform încărcării, sistemul îndepărtează picăturile în recipiente diferite. Metoda de aplicare a sarcinii variază în funcție de diferitele sisteme utilizate în FACS. Echipamentul utilizat în FACS este cunoscut ca un sorter de celule cu fluorescență activat.

Care este similitudinea dintre fluxul de citometrie și FACS?

• Citometria de flux și FACS sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice.

Care este diferența dintre cytometrie de flux și FACS?

Flow cytometry vs FACS
Citometria de flux este o metodologie utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferitele molecule de suprafață celulară, mărime și volum care permite investigarea celulelor singulare.	FACS este un proces prin care un amestec de celule de probă este sortat în funcție de caracteristicile lor de dispersie a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente.

Rezumat - flux Citometrie vs FACS

Celula este unitatea structurală și funcțională de bază a tuturor organismelor vii. Sortarea celulelor este procesul prin care celulele sunt izolate și diferențiate în diferite categorii pe baza proprietăților lor intracelulare și extracelulare. Flow cytometry și FACS sunt două metodologii importante în sortarea celulelor. Ambele procese sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice. Citometria în flux este o metodologie utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferitele molecule de suprafață celulară, mărime și volum care permite investigarea celulelor singulare. FACS este un proces prin care un amestec de celule de probă este sortat în funcție de caracteristicile lor de dispersie a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. Aceasta este diferența dintre Cytometry Flow și FACS.

Descărcați versiunea PDF a citometriei cu flux vs FACS

Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline conform notei de citare. Descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre fluxul de citometrie și FACS

Referinţă:

1. Flow cytometry (FCM) / FACS Fluorescență - sortarea celulelor activate (FACS). Accesat la 22 septembrie 2017. Disponibil aici
2. Ibrahim, Sherrif F. și Ger van den Engh. "Citometrie în flux și sortare celulară" SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1 ianuarie 1970 ... Accesat 22 septembrie 2017. Disponibil aici

Datorită fotografiei:

1. "Cytometer" prin Kierano - Muncă proprie, (CC BY 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia
2. "Sortarea celulelor asistate de fluorescență (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Dezvoltarea unui model model in vitro pentru studierea interacțiunii IgE Equus caballus cu receptorul FcεRI cu afinitate ridicată (teză de doctorat), Universitatea din Sheffield,(CC BY-SA 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia